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实验室安全管理规范之如何控制微生物实验室的质量

2019-08-27

1、高压灭菌锅的温度控制


高压灭菌锅;生物指示菌法(常用)、化学变色纸片及高压灭菌锅温度计等方法进行检测。


生物指示菌法是一种高压灭菌锅的效果显示法。


高压灭菌锅由专人按作业指导书操作,并做好每一次的作业记录。


高压灭菌锅使用时,内置物品不能太多,单位体积内的内容物(每瓶内的培养基)不能太多。同时应注意内容物不同耐受温度。总的暴露时间不要超过45min。


高压灭菌锅日常工作记录应包含以下信息:高压灭菌的材料、开始时间、压力/温度、取出时间、高压灭菌胶带的颜色变化(日常常用无菌培养代替)。


高压灭菌锅温度波动范围:110,115和121±2℃。


高压灭菌锅校准周期一般在半年。


2、干燥灭菌箱温度控制


干燥灭菌箱日常工作记录中应包括以下信息:开始的时间、到达灭菌温度时的时间、取出的时间(或关闭时间)。


干燥灭菌箱的温度校准;用参考温度计进行温度测试。


干燥灭菌箱温度要求度:160±5 ℃或180 ±5 ℃。前者为灭菌2h,后者为30min。


干燥灭菌箱校准时间一般为一年。


3、培养基配制用蒸馏水的控制


对于蒸馏水器来说:按设备说明,定期清洁离子交换器和更换离子交换材料。


检测要求:西欧标准为微生物检验用蒸馏水的特定电导率<0.5ms/m;细菌数<50cfu/ml。我们日常用的标准为 <10ms/m,未见有细菌指标。

检测频率:1次/每月。


蒸馏水定点供应,并做好相应的质量控制,记录检测结果。


4、天平的管理


天平放置要求:无振动、无气流影响及水平台面上。


天平要有使用及运行检查记录。


天平作为计量仪器是列入国家强制检定的范围,一般1次/年进行检定。

运行检查频率按运行计划或按产品(天平生产厂家)给出的标准重量单位进行对照。


5、pH计


pH计使用前应用标准液进行校准。

缓冲液使用有效期:PH4.00 约1年

PH7.00 约6个月

pH9.00 约6个月

pH计的维护:电极外表的定期清洗;电极敏感性检测及极性恢复。


6、净化工作台的控制


水平流净化工作台工作区域,要求洁净度为100级。空气沉降30min,细菌数<1个/皿。垂直流净化工作台,细菌数<0.49个/皿。


净化工作台运行检查频次:1次/月主要是细菌沉降检测。


净化工作台高效过滤膜一般为一年更换一次,并同时进行粒子与细菌沉降检测。


7、紫外线灯的控制


检测方法:仪器测试法和生物测试法。前者是通过专用仪器检测紫外灯管发射的紫外光强度。国家消毒技术规范中表明在距离照射无1米处,要求其强度为90。


生物测试法:采用一定的菌培养物,经一定比例稀释,菌量控制在200-250个/0.5ml,涂布平板在紫外灯光下照射,2min,同时设置普通光源的对照组,后置37℃48h,计算其杀灭率。要求杀灭率达99%。


8、显微镜的控制


显微镜应制定作业指导书,日常维护记录及自校记录。


显微镜应置于无振动,避免灰尘,防潮等要求的环境。


9、其它微生物检测专用仪器的控制


细菌鉴定仪、酶标仪等设备,工作中常用阳性对照检测其功能正常性。


仪器的检定则按有关的部门检定或按自校作业指导书进行。


仪器的使用登记、校准计划、校准记录等文件存档。


仪器专人使用、操作者应取得相应的岗位培训合格,持证上岗。


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